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GeneTex超强WB发光底物

人阅读发布时间：2017-03-22 17:45

免疫印迹试验（Western blot）

免疫印迹试验（Western blot）是利用抗体与抗原间的专一性结合来侦测特定蛋白质的表现，为现代生物化学、细胞生物学、免疫遗传学中常见的实验方法，也被广泛应用于蛋白表达水平的研究、抗体活性检测和早期疾病诊断等多个方面。免疫印迹试验的技术是结合蛋白质胶体电泳 (gel electrophoresis)的高度解析力、抗体的专一性以及酵素的敏感性，使得科学家们得以在复合物中大海捞针般的寻找蛋白质的存在。一开始以电泳将蛋白质进行大小排列与分离，再利用电场将蛋白质转印到膜上，接着，拥有抗原表位的蛋白质分子就可被抗体（一抗）特异性识别并与之结合。在此基础上，酶或荧光标记的二抗再进一步识别并结合一抗，通过与底物反应显色来观察目标蛋白的表现。

Western blot若利用酵素反应呈色
由于受质的不同，显色的方法可区分为：

● 化学冷光法： Chemiluminescent-based signal detection。
● 直接呈色法： Colormetirc/Chromogen-based signal detection。
● 荧光呈色法： Fluorescent substrate-based signal detection。

发表文献上，又以化学冷光法为最常使用及最方便的呈色方法化学冷光法(Chemiluminescent-based signal detection)的原理是利用二抗接上辣根过氧化物酶(HRP)，在H₂O₂存在时，HRP会氧化化学发光物质鲁米诺（lumino，氨基苯二酰一肼）而发出冷光，加上化学增强剂的作用，冷光强度可以增大1,000倍以上。化学冷光法操作简便，只需将两种显色底物等体积混合，再将转印后的膜覆盖在上进行呈色反应，后续讯号侦测可藉由底片感光、显影、定影等冲洗步骤，或是自动化光学检测仪器来得到实验结果。

GeneTex 开发的Trident HRP Substrate (化学发光底物)系列产品，原本仅供公司内实验室使用，因客户询问度高，且经过上万笔实验测试，2016年正式将其产品化，提供给客户使用。

图一：化学发光底物作用示意图

GeneTex Trident HRP Substrate系列产品优势：

● 灵敏度高：优于市面产品(见图), 最高可检测到飞克 (femtogram ;10^-15 g)级的蛋白
● 稳定性强： A、B试剂单独存放2~8℃, 避光条件下可保存12个月
● 节约时间：不需做条件优化, 入门新生立即可轻松上手
● 节省样品：对于样品珍贵或是表达量少的蛋白, 仅需少量蛋白即可侦测
● 背景值低：杂讯少, 讯号强

产品名

Trident plus Western HRP Substrate

Trident pico Western HRP Substrate Applications

Trident femto Western HRP Substrate

货号	GTX400006	GTX17435		GTX14698
应用与特色	一般日常操作	长时间或多次曝光		微量蛋白
灵敏度	皮克 picogram (10^-10~10^-12)	皮克 picogram (10^-12)		飞克 femtogram (10^-15)
包装大小	500 ml	100 ml	500 ml	100 ml	200 ml