免疫组织化学（IHC）是根据抗原及抗体间专一性的结合反应，检测组织切片中的抗原（如蛋白），进行组织定性和定位分析的一种技术。虽然相较于 WB 及 ELISA 等分析方法而言其定量功能较低，但利用 IHC 可以完整观察组织型态与目标抗原相对位置，此点在病理诊断上尤其重要，因此被广泛应用于科研及临床诊断等领域。

IHC 的基本操作技术并不复杂，选择高质量/高特异性的抗体就可以让实验先成功一半，但操作过程中仍有许多小细节会影响实验最终的呈色结果。
 

GeneTex 身为优质抗体制造商，在验证公司内五万支抗体的过程中累积了极丰富的经验，在此不藏私的与大家分享一些常见的问题，希望可以对读者们提供一些帮助。

使用酶标二抗呈色，优点为可放大讯号反应，同时有色的沉淀物有光稳定性，染色完毕之后切片可长期保存。同时，切片的检测仅须利用一般的光学显微镜即可进行观察。

酶呈色的方法，又可依照二抗所接的酶的种类（HRP 或是 AP），选用不同的底物（substrate）来进行反应，生成有色的沉淀。依照色原/底物的不同，可分为下列几种：

实验室若有荧光显微镜，就可以利用不同物种的一抗进行染色，观察两种以上的目标抗原在组织中的相对表现位置。
 

总结以上，使用者可以根据「实验室现有的器材」、「实验需求」、「样品种类」，来选择适合的切片方式（冰冻切片、石蜡切片）或是使用整体染色。进一步再依据「是否有荧光显微镜」、「是否需要观察两种以上的目标抗原表现」、「是否需要放大讯号」来决定要使用哪种二抗进行染色。
 

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