单一细胞外囊泡分析:胰腺导管腺癌早期检测新助力

细胞外囊泡简介

Extracellular vesicles (EVs)泛指各式各样从细胞释出且带有生物分子的膜状构造，包括: exosomes、microvesicles与apoptotic bodies等。

细胞外囊泡是50纳米至2微米的囊泡，从许多不同类型的细胞表面释放到不同的体液中，包括血浆、乳汁、唾液、汗液、泪液、精液和尿液。外泌体(50-100纳米)是一种同质的细胞外囊泡群，当多囊泡内体(multivescular endosomes)在高度调节的过程中与质膜融合时，从细胞中释放出来，随后释出它们的内容物；而微泡是直径达2微米且更加异质的细胞外囊泡群，其通过细胞膜向外出芽和囊泡脱落形成，该过程涉及钙依赖性信号传导和酶活性；凋亡(Apoptosis)的细胞则释放直径为1-5微米的细胞外囊泡，被称为凋亡小体。其中外泌体携带许多细胞的重要信息，如脂筏(Lipid rafts)、蛋白质，以及一些遗传物质(核酸)，也是近年来的热门研究主题，被用来进行细胞与细胞之间的沟通。取得方便且具有特定生物意义的特性，使得EVs成为了理想的疾病相关bio-marker与治疗诊断参照物 (ref 1)。

sEVA是什么?

与动辄单次必须使用上百上万个EV进行的大总量分析法不同的是，single-EV analysis (sEVA)如其名所述，是针对单一EV搭配进行多种荧光染色、单颗粒干涉仪(single particle interferometric reflectance imaging sensor (SP-IRIS)) 粒径量测、奈米颗粒追踪、微流体电阻脉冲感应(microfluidic resistive pulse sensing (MRPS))等等方法进行的分析方法(ref 2)。透过sEVA，除了可以检测不同分子的共定位关系、群体中的出现频率之外，也能进一步藉由分析主要成分来定义EV的分类与代表的生理意义(ref 2)。

 

 

如何将sEVA应用于PDAC诊断?

胰腺导管腺癌（PDAC）是癌症死亡的主要原因之一，许多病患确诊时已经是癌症晚期，只有约20%的患者可藉由手术切除等方式治愈。然而PDAC的细胞异质性、释出具有bio-marker的EV总量太少等等因素，也让EV分析在PDAC诊断评估的应用上迟迟没有进展(ref 2)。

 

Ferguson et al.利用sEVA的特性，巧妙避开了大总量分析法对于仅有少量bio-marker阳性EV侦测上的弱势，并随之提出了sEVA检测早期PDAC的强大潜力(ref 2)。作者首先检查了11种PDAC相关模型细胞株，以评估潜在生物标志物的存在，其中约有40%的EV对母系中表达的突变KRAS或p53蛋白呈阳性。作者同时也利用盲测的方式针对已确诊不同程度的16位PDAC患者进行方法确效。实验结果显示在初期PDAC患者的样本中，只有不到0.1%的EV呈现突变KRAS或p53阳性反应，这对于EV用于评估诊断可说是相当大的挑战。令人印象深刻的是，Ferguson et al.所建立的sEVA分析平台成功地可视化了其中15名患者的突变bio-marker阳性EV，并且证实了sEVA分析结果对于肿瘤体积的高敏感度(~0.1立方公分)远优于当前其他分析技术(ref 2)。虽然在bio-marker与相关抗体的挑选上，可能带来一些不确定性，但Ferguson et al.的研究确实发掘了sEVA应用于早期癌症检测的潜力。

 

GeneTex为癌症生物学研究提供了大量经过验证的抗体与试剂，其中包括了促癌蛋白特定点突变的重组单克隆抗体等，这类能满足研究者制定的严格特异性标准的产品等。Ferguson et al.于上述的研究中，正是使用了GeneTex的RAS (G12D Mutant) antibody [HL10] (GTX635362)做为PDAC的bio-marker。欲了解相关产品，请参考以下重点商品、相关文宣品或造访我们的网站www.genetex.com以获取更多信息。
 

重点产品

RAS (G12D Mutant) antibody [HL10] (GTX635362)    

 

RAS (G12A Mutant) antibody [HL1153] (GTX636434)   

 

RAS (G12V Mutant) antibody [HL169] (GTX635623)   

 

CD81 antibody (GTX101766)    

 

TSG101 antibody [4A10] (GTX70255)     

 

重点产品

目录号	产品名	应用
GTX637264	CD81 antibody [HL1666]	WB, ICC/IF
GTX116041	H-Ras antibody	WB, ICC/IF, IHC-P, IP
GTX637440	HSC70 antibody [HL1788]	WB, IHC-P
GTX108598	N-RAS antibody	WB
GTX132403	RAS (A59T Mutant) antibody	WB
GTX636434	RAS (G12A mutant) antibody [HL1153]	WB
GTX635362	RAS (G12D Mutant) antibody [HL10]	WB, ICC/IF, IHC-P
GTX635623	RAS (G12V Mutant) antibody [HL169]	WB, IHC-P
GTX132412	RAS (G13D Mutant) antibody	WB
GTX132416	RAS (K117N Mutant) antibody	WB
GTX135497	RAS (Q61R Mutant) antibody	WB, ICC/IF
GTX132480	RAS antibody	WB, IHC-P
GTX105575	RRAS antibody [N1C3]	WB, IHC-P
GTX635396	TSG101 antibody [4A10-RB]	WB, ICC/IF

 

参考文献

1. Cells. 2019 Jul 15;8(7):727. doi: 10.3390/cells8070727.

2. Sci Adv. 2022 Apr 22;8(16):eabm3453. doi: 10.1126/sciadv.abm3453.

 

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